Nội dung trưng bày của Bảo tàng Phụ nữ Nam Bộ gồm các chuyên đề: Hình tượng người phụ nữ trong tín ngưỡng dân gian; Trang phục, trang sức truyền thống của phụ nữ các dân tộc ở miền Nam; Làng nghề truyền thống của phụ nữ các dân tộc ở miền Nam; Đội quân tóc dài; Giặc đến nhà đàn bà cũng đánh; Công tác ngoại giao; Đấu tranh của nữ tù; Mẹ Việt Nam anh hùng thành phố Hồ Chí Minh; Bác Hồ với phụ nữ miền Nam; Phụ nữ miền Nam trong xây dựng đất nước.